CRISPR新小分子抑制器

CRISPR基因组编辑字面上每周我们读出新突破 以创新方式使用CRISPR/Cas9多项应用典型基因编辑 基因静默 精密工程标签染色体带荧光蛋白质记录手机事件中脱氧核糖核酸和临床试验CRISPR癌症治疗集启动快

CRISPR核素中有一个方面被忽略了:我们如何干扰它们的活动?蛋白抑制器很常见,鉴于多小分子嵌入复合库,识别那些减少或完全中断CRISPR/Cas9活动者应是一项直截了当的任务CRISPR核素在这方面也是独一无二的,识别抑制器是挑战性工作幸运的是,BROAD学院MIT和哈佛研究队上报识别小分子可操作CRISP/Cas9strepcoccus寄生物.

问题

strepcocccusycas9复杂与引导RNA(Orange)和目标脱氧核糖核酸图片取KVaitss4OO8)

有几种应用可受益于CRISPR抑制器CRISPR/Cas9有离目标效果,限制活动时间窗口可提高精度特别是对于子线编辑应用,调制编辑可减色-生物由不同基因型细胞组成,由离目标变异引起免细胞CRISP应用中开关CRISP提供设计弹性医疗应用中受控抑制可减少CRISPR相关细胞毒性,仅在需要时激活蛋白

CRISPR/Cas9综合带指南RNA和DNA分子对工作极具挑战性CRISPR将脱氧核糖核酸绑定CRISPR像稀疏一样绑定 复合体大积并抑制它 需要两种稀疏蛋白停止作用

方法线

CRISPRCS9系统源码 :维基百科

Basudeb Maji及其协作者集中力量禁止Cas9与Protospacer相邻motif交互Cas9内有几个潜在目标,但已证明与PAM的互动对功能至关重要研究交互作用(小分子会如何阻塞它) 他们开发了荧光极化解析: 生成脱氧核糖核酸分子脱氧核糖核酸绑定

Cas9-DNA综合体不自然维系强交互作用,因此研究人员生成脱氧核糖核酸分子并同时重复绑定网站产生复杂过程依赖剂量并适合研究ligand交互除层冗余外,研究人员开发了三种单频细胞解析法,即Cas9核素活动干扰、抑制转录或激活荧光蛋白基因

广度科学家筛选数千小分子出自商业和自然复合库筛选结果产生两种复合物(BRD7087和BRD5779),这些复合物绑定Cas9并减少所有解析活动研究者使用这两个分子的化学结构向导研究结构交互并测试相似分子顶级性能者复合BRD0539显示下列趣味特征:细胞渗透性、无细胞毒性、依赖剂量响应和逆向动作

工作为何重要

蛋白质抑制CRISPR, 微量分子无法渗透细胞膜并显示不稳定性由特征小分子抑制器组成的库克服了这些限制并提供了易中或中断CRISPR/Cas9活动的途径

此外,开发的高通量系统可用于测试不同复合库中的其他分子和CRISPR其他变异式(如CRISPR/Cpf1)。CRISPR-DNA综合体难以合作,广学团队提供技术挑战解决方案可成为进一步研究的踏脚石

更重要的是,小分子以特定位置为对象并改变CRISP特征可成为深入理解并工程CRISP自身的宝贵工具例子之一是抗生素对核素研究的贡献小分子-a.k.a.a.抗生素-目标化具体步骤并例行暂停过程,确定精确分子机制与蛋白合成运动学,甚至帮助确定人体核素疾病和微生物抗生素抗药性的原因小分子抑制器最终可在CRISP研究中产生类似效果,并可能有助于生成更强健或专业CRISPR核素

CRISPR留守 精确分子剪切器 开通基因组操作可能性实情是,这个工具还不如我们所期望的那样精通易行Maji及其合作者的工作显示,我们可以处理CRISPR的一些挑战,并可能促进开发更多创新应用

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